Phos-tag SDS-PAGE データ集 ATM
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ATM

Serine/threonine protein kinase which activates checkpoint signaling upon double strand breaks (DSBs), apoptosis and genotoxic stresses such as ionizing ultraviolet A light (UVA), thereby acting as a DNA damage sensor.
Mw; 350,000

 

泳動結果

ATM

ATMは高分子量(350 kDa) であるため，
3％という低濃度のポリアクリルアミドゲルを用いて解析しています。
3％ではゲルが柔らかすぎて扱いにくいため，
0.5％アガロースを加えて補強しています。

HeLa細胞血清存在下で培養し，
actinomycin(2µM)を添加して5時間後にATMのリン酸化状態を
Mn2+–Phos-tag SDS-PAGEで解析しています。

関連画像

ATM

 

Reference

Kinoshita, E., Kinoshita-Kikuta, E., Ujihara, H., and Koike, T.
Mobility shift detection of   phosphorylation on large proteins using a Phos-tag SDS-PAGE gel strengthened with agarose.        
 Proteomics, 9, 4098–4101 (2009)

doi: 10.1002/pmic.200900020.

Kinoshita, E., Kinoshita-Kikuta, E., and Koike, T.
Separation and detection of large phosphoproteins using Phos-tag SDS-PAGE.
Nature Protocols, 9, 1513–1521 (2009) 

doi:  10.1038/nprot.2009.154.
ゲルの条件

Mn2+–Phos-tag:　20µM

 Polyacrylamide: 3%(w/v)
    +
 Agarose 0.5%(w/v)

検出方法

　WB: anti-ATM

   anti-pATM(pS1981)
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