Phos-tag SDS-PAGE database Erk1 Erk2

Erk1, Erk2

aSerine/threonine kinase which acts as an essential component of the MAP kinase signal transduction pathway.
Mw: Erk1= 42.000, Erk2 = 44,000

Image

Erk12

A431細胞を上皮成長因子(EGF)で刺激した時の，
細胞内の Erk1/2 のリン酸化状態を調べています。

各時刻に，細胞をTBSで洗浄した後，RIPAバッファーに溶解し，
可溶性画分のタンパク質を電気泳動しています。

通常のSDS-PAGE では，Erk1 とErk2 のバンドが見られます。
抗リン酸化Erk1/2(pT202/pY204)抗体によるWestern解析から，
EGF刺激によって，T202/Y204 がリン酸化される様子がわかります。

Mn²⁺–Phos-tag SDS-PAGE では，EGF刺激によってバンドが増えています。
抗リン酸化Erk1/2(pT202/pY204)抗体で検出される，上方の３本がリン酸化バンドです。

Reference	Kinoshita-Kikuta, E., Aoki, Y., Kinoshita, E., and Koike, T. Label-free kinase profiling usingphosphate affinity polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular & Cellular Proteomics, 6, 356–366 (2007) DOI:10.1074/mcp.T600044-MCP200
Composition of gel	Mn²⁺–Phos-tag:　25µM Polyacrylamide: 7.5%(w/v)
Detection	WB: anti-Erk1/2 antibody anti-pErk1/2 (pT202/pY204)antibody

Reference

Kinoshita-Kikuta, E., Aoki, Y., Kinoshita, E., and Koike, T. Label-free kinase profiling usingphosphate affinity polyacrylamide
gel electrophoresis. Molecular & Cellular Proteomics, 6, 356–366 (2007)

DOI:10.1074/mcp.T600044-MCP200

Composition of gel

Mn²⁺–Phos-tag:　25µM

Polyacrylamide: 7.5%(w/v)

Detection

WB:
anti-Erk1/2 antibody

anti-pErk1/2 (pT202/pY204)antibody