Phos-tag SDS-PAGE database tau

Tau (His-tag, Human, Recombinant)

Non-glycosylated and non-phosphorylated form of the 441 amino acidTau splice variant. Tau is thought to promote normal microtubuleassembly and stabilize microtubules in vivo. Hyperphosphorylated andglycated Tau tends to self-assemble and form paired helical filaments(PHFs), which are the basic structural components of neurofibrillarytangles (NFTs). NFT accumulation correlates with the clinicalprogression of Alzheimer’s Disease.
Mw: 60,000

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各レーンは，以下のキナーゼによる，Tau の in vitro kinase assayです。
1. kinase なし, 2. GSK-3β, 3. cdk5/p35, 4. PKA 5. MAPK 6. CKII 7.CaMKII

Normal SDS-PAGEでも，キナーゼ反応によって
わずかにシフトアップする場合があります。
シフトアップしたバンドは，³²Pオートラジオグラフィで検出されることから，
リン酸化されていることがわかります。
Mn²⁺–Phos-tag SDS-PAGE では，
キナーゼ反応後，複数のシフトアップバンドが検出されます。
（矢印で示したバンドは，キナーゼ由来のバンドで，tauではありません）

Tau Tyr kinase assay(ABL, MET, FYN)_Zn²⁺-Phos-tag SDS-PAGE

Tau Ser/Thr kinase assay_2D analysis

Reference	Kinoshita-Kikuta, E., Aoki, Y., Kinoshita, E., and Koike, T. Label-free kinase profiling usingphosphate affinity polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular & Cellular Proteomics, 6, 356–366 (2007) DOI:10.1074/mcp.T600044-MCP200
Composition of gel	Mn²⁺–Phos-tag:　80µM Polyacrylamide: 7.5%(w/v)
Detection	1.　silver stain 2.　autoradiography

Reference

Kinoshita-Kikuta, E., Aoki, Y., Kinoshita, E., and Koike, T. Label-free kinase profiling usingphosphate affinity polyacrylamide
gel electrophoresis. Molecular & Cellular Proteomics, 6, 356–366 (2007)

DOI:10.1074/mcp.T600044-MCP200

Composition of gel

Mn²⁺–Phos-tag:　80µM

Polyacrylamide: 7.5%(w/v)

Detection

1.　silver stain

2.　autoradiography

Tau (His-tag, Human, Recombinant)

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